哺乳动物细胞瞬时表达服务
服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
我们拥有达到cGMP标准的百级洁净细胞房,拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验。
服务优势:
1、美仑生物的哺乳动物细胞蛋白表达技术团队拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验。
2、哺乳动物瞬时表达系统以HEK293细胞和CHO细胞为表达宿主。
3、高成功率:我们会分析您的蛋白/抗体基因序列,结合自主研发高表达载体,实验成功率>95%。
4、我们专有的高密度(High Density, HD)哺乳动物瞬时表达技术,以及优化的表达方案和培养基,确保蛋白和抗体产量达到g级水平。
5、我公司哺乳动物表达系统可实现复杂糖基化修饰,蛋白活性更高。
6、可实现瞬时转染表达,蛋白、抗体的快速小量制备。
7、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。
8、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。
9、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。
10、具有一定的灵活性,我们可根据客户的不同需求,提供不同的实验方案,尽最大的努力满足客户的要求。
服务内容:
主要流程 |
时间 |
内容 |
交付内容 |
基因合成及密码子优化 |
1-2周 |
客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。 |
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目标基因亚克隆到哺乳动物细胞表达载体 |
1-2周 |
1.克隆至表达载体 |
测序报告(若客户要求) |
小量转染并通过Western Blot检测表达 |
2-3周 |
1.瞬时转染HEK293/CHO细胞 |
1. 0.1-0.5mg纯化蛋白样品 |
目标蛋白表达及纯化 |
6-8周 |
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目标蛋白的再加工及详细检测 |
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筛选稳定高效的细胞株 |
周期将延长 |
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大量表达、纯化及检测(可选) |
3-8周 |
100mg或更多蛋白 |
1.纯化蛋白 |
服务报价:15000元+(不含载体构建)
毕赤酵母(P.pastoris)表达服务
服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
毕赤酵母蛋白表达服务,会从目的基因的特性,基因剂量,整合位点,以及宿主选择,转化子表型和培养条件等多方面入手,再通过文献查阅,密码子分析,蛋白表达系统条件优化等途径生产出高纯度蛋白。
服务优势:
1、美仑生物具有丰富的酵母蛋白表达经验,已成功表达出多种重组蛋白。
2、我公司具有筛选酵母表达高拷贝菌株的服务,可以满足客户的多种特殊需求。
3、我公司利用酵母表达系统成功表达过具有二硫键蛋白及糖基化蛋白,使蛋白具有类似天然的结构和翻译后修饰,保证了蛋白的活性。
4、酵母系统表达的过程中,对诱导时间及温度的控制,对培养条件和菌株生长周期的把握直接影响到重组蛋白表达的成败,美仑生物的技术人员对整合流程把握和控制,提高表达的成功率及表达水平。高生产率:分泌信号序列保证了重组蛋白的大分泌量。
5、我公司可提供两种表达体系:可选择组成性表达或者诱导表达两种体系。
6、我公司具有多种菌株和载体可供选择:我们提供包括X33, GS115等多种菌株和多种载体。
7、可进行大规模生产,高达200L的生物反应器保证克级水平蛋白的生产。
8、我公司具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。
9、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。
10、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。
服务内容:
主要流程 |
内容 |
时间 |
交付内容 |
基因合成及密码子优化 |
客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。 |
1-2周 |
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目标基因的亚克隆及 |
1.克隆至合适的表达载体 |
1-2周 |
测序报告(若客户要求) |
P.pastoris表达菌株筛选 |
酵母表达初筛 |
3-4周 |
1.1-3mg蛋白 |
酵母表达菌株鉴定 |
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P.pastoris表达菌株表达优化 |
酵母蛋白表达纯化 |
3-4周 |
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大量表达及纯化(可选) |
更多蛋白 |
3-8周 |
1.纯化蛋白 |
服务报价:10000元+(不含载体构建)
杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务
服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector system,BEVS)是当今基因工程四大表达系统之一。BEVS属于真核表达系统,通过BEVS得到的重组病毒易于筛选、具有翻译后修饰功能、表达外源基因的效率较高。BEVS还可以同时表达多个外源基因,在分泌蛋白生物活性的同时增加产量。因此,BEVS在科研和工业生产中通常应用于大规模重组蛋白的制备。
服务优势:
1、高效性:我们的系统基于最新的技术,保证胞内或者分泌的重组蛋白的高水平表达。具有易于表达异源多聚体蛋白、安全性高等特点,重组表达的蛋白产品具有正确的翻译后修饰和生物学活性,如二硫键的形成、磷酸化、糖基化等。
2、我公司昆虫表达系统可表达分子量较大的外源性基因(最高可达200kD),适合大分子蛋白的表达;最高表达量可达昆虫细胞蛋白总量的50%。
3、多种昆虫动物细胞Sf9,Sf21及其它昆虫细胞系可供选择。
4、昆虫表达系统比哺乳动物细胞表达系统操作简单。
5、一站式解决方案,从基因合成到蛋白表达纯化。
6、重组蛋白生物活性高,表达水平高,能同时表达多个基因。
7、可添加信号肽,促进蛋白更易纯化。
8、相对哺乳动物细胞表达系统成本低。
9、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。
10、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。
11、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。
12、具有一定的灵活性,我们可根据客户的不同需求,提供不同的实验方案,尽最大的努力满足客户的要求。
服务内容:
主要流程 |
时间 |
内容 |
交付内容 |
基因合成及密码子优化 |
1-2周 |
客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。 |
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目标基因亚克隆到pFastBac供体质粒 |
1-2周 |
1.克隆至表达载体 |
测序报告(若客户要求) |
制备重组杆状病毒Bacmid DNA |
2-3周 |
1.病毒包装 |
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目的蛋白的表达纯化 |
2-4周 |
1.病毒侵染细胞 |
1. 0.1-0.5mg纯化蛋白样品 |
大量表达、纯化及检测 |
3-8周 |
100mg或更多蛋白 |
1.纯化蛋白 |
服务报价:20000元+(不含载体构建)
大肠杆菌(E.coli)表达系统服务
服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
原核表达系统是通过原核生物来获得外源蛋白的体系。原核表达是目前常用的重组蛋白表达方式之一,操作相对简便,要求较低。相对哺乳动物表达系统更加经济节约。
服务优势:
1、美仑生物拥有丰富的大肠杆菌可溶性蛋白表达、纯化及蛋白变复性经验。
2、我公司拥有多种E. coli细胞株和表达载体,满足特定蛋白质胞内表达及周质空间分泌表达需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融标签解决蛋白自身疏水性造成不可溶表达问题。提供从密码子优化到重组蛋白表达、纯化的一站式服务以及标签去除、内毒素去除等附加服务,以满足不同的定制需求。
3、针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。
4、我们会通过评估确定复性条件,进行温和的包涵体变复性。
5、我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。
6、我们具有特色的低温诱导表达体系,提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功和蛋白产物的活性概率。可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。
7、可进行大规模生产。
8、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。
9、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。
10、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。
服务内容:
主要流程 |
时间 |
内容 |
交付内容 |
基因合成及密码子优化 |
1-2周 |
客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。 |
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载体构建 |
1-2周 |
1.克隆至合适的表达载体(可选择的表达载体以pET和pGEX系列为主) |
测序报告(若客户要求) |
表达鉴定及可溶性分析 |
1-2周 |
1.10mL培养 |
表达评估报告 |
放大表达和1-2步纯化 |
1-2周 |
1.蛋白纯化 (可溶表达) |
1.0.5-1mg纯化蛋白样品 |
大量表达及纯化(可选) |
2-8周 |
1.100mg或更多蛋白 |
1.纯化蛋白 |
附加项订购信息 |
时间 |
内容 |
交付内容 |
蛋白去内毒素 |
1-2周 |
去除蛋白内毒素 |
质量检测报告(CoA) |
服务报价:8000元+(不含载体构建)